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세포 배양이 적혈구를 먼저 용해시키는 이유는 무엇입니까?

2022-12-23

기본 소개
적혈구 용해물은 적혈구를 제거하는 가장 간단하고 쉬운 방법 중 하나입니다. Lysate cleavage는 온화한 적혈구 제거법으로 조직 단백질 및 핵산 실험에서 효소 소화에 의해 분산된 조직 세포의 분리 및 정제, 림프구의 분리 및 정제, 적혈구 제거에 주로 사용됩니다. 산 추출. 적혈구의 용해물에 의해 얻어진 조직 세포는 적혈구를 포함하지 않으며, 추가로 1차 배양, 세포 융합, 유세포 분석, 핵산 및 단백질의 분리 및 추출 등에 사용될 수 있다.

사용 지침
조직 세포 샘플
1. 신선한 조직을 췌장/효소 또는 콜라게나제에 의해 소화시키고 단일 세포 현탁액으로 분산시키고, 상청액을 원심분리하여 버렸다.

2. 4℃의 냉장고에서 ELS 용해물을 꺼내 세포 침전물에 ELS 용해물을 1:3-5의 비율로 첨가하고(밀착된 세포 1ml에 용해물 3-5ml 첨가) 부드럽게 불어 혼합합니다.

3. 800-1000rpm에서 5-8분 동안 원심분리하고 상단의 빨간색 투명한 액체를 버립니다.

4. 침전된 부분을 모아 Hank's solution 또는 무혈청 배양액으로 2~3회 원심분리하였다.

5, 크래킹이 완료/완료되지 않은 경우 2단계와 3단계를 반복할 수 있습니다.

6. 후속 실험을 위한 재현탁 세포; RNA를 추출할 경우 DEPC water를 사용하여 Step 4에서 준비한 용액에서 추출하는 것이 가장 좋습니다.

적혈구는 수명이 120일로 매우 짧지만 혈액 재생산이 매우 빠르고 이 경우 특히 세포 분열 능력이 뛰어나며 모든 세포 중에서 가장 빨리 분열하는 세포이기 때문에 이 세포는 매우 가치가 있으며, 그래서 세포 배양에 매우 유용합니다. 매우 간단합니다. 세포소기관이 없고 세포막과 단백질만 있습니다.

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