ELISA 키트는 항원 또는 항체의 고체상과 항원 또는 항체의 효소 라벨링을 기반으로 합니다. 고체 담체의 표면에 결합된 항원 또는 항체는 여전히 면역학적 활성을 유지하고 효소 표지된 항원 또는 항체는 면역학적 활성 및 효소 활성을 모두 유지합니다. 결정 시, 시험 중인 검체(항체 또는 항원이 측정됨)는 고체 담체 표면에서 항원 또는 항체와 반응합니다. 고체 담체에 형성된 항원-항체 복합체는 세척에 의해 액체 내 다른 물질과 분리됩니다.
효소 표지된 항원 또는 항체가 첨가되며, 이들은 또한 반응에 의해 고체 담체에 결합합니다. 이때 고상 중의 효소량은 검체 중의 물질량에 비례한다. 효소 반응의 기질을 첨가한 후 기질은 효소에 의해 촉매 작용을 받아 유색 생성물이 됩니다. 제품의 양은 검체에 함유된 피검물질의 양과 직결되기 때문에 색의 깊이에 따라 정성적 또는 정량적 분석이 가능하다.
효소의 높은 촉매 효율은 면역 반응 결과를 간접적으로 증폭시켜 분석을 매우 민감하게 만듭니다. ELISA는 항원을 결정하는 데 사용할 수 있지만 항체를 결정하는 데에도 사용할 수 있습니다.
ELISA 키트의 기본 원리
항원과 항체의 특이적 반응을 이용하여 대상물을 효소에 연결한 다음 효소와 기질 사이의 발색 반응을 일으켜 정량을 결정합니다. 측정 대상은 항체 또는 항원이 될 수 있습니다.
이 결정 방법에는 세 가지 시약이 필요합니다.
â 고체상 항원 또는 항체(면역 흡착제)
â¡ 효소 표지 항원 또는 항체(마커)
⢠효소 작용 기질(발색제)
측정에서 항원(항체)은 먼저 고체 담체에 결합하지만 여전히 면역 활성을 유지한 다음 항체(항원)와 효소의 접합체(마커)를 추가하여 여전히 원래의 면역 활성과 효소를 유지합니다. 활동. 접합체가 고체 담체 상의 항원(항체)과 반응할 때, 효소의 상응하는 기질이 첨가된다. 즉, 촉매 가수분해 또는 REDOX 반응 및 색상입니다.
생성되는 색상의 음영은 측정할 항원(항체)의 양에 비례합니다. 이 착색된 생성물은 육안으로 관찰할 수 있으며, 광학현미경, 전자현미경, 분광광도계(효소표식기기)로도 측정할 수 있다. 이 방법은 간단하고 편리하며 빠르고 구체적입니다.